当前,新突发传染病防控已成为全球公共卫生的重要课题;猴痘作为一种新兴传染病,对人类健康构成潜威胁。疫苗研发是应对此类疾病的关键手段,而疫苗构建与筛选技术的创新突破,直接决定了疫苗开发的效率和质量。 中国生物新突发传染病新型疫苗研发全国重点实验室病毒载体和重组病毒技术研究团队针对该需求,创新性地将CRISPR-Cas基因编辑技术应用于传统痘苗病毒天坛株(VTT)的改造工作。这项技术突破改变了既往疫苗开发中的关键瓶颈。 传统的同源重组技术在病毒基因组编辑中存在明显不足:整合效率低下,导致毒株获取周期长,严重制约了疫苗研发进度。研究团队通过引入CRISPR-Cas基因编辑技术,实现了对病毒基因组多个位点的精准、定向编辑,彻底解决了这一问题。他们有针对性地敲除了与病毒毒力、宿主范围及免疫调节密切对应的的多个基因片段,包括C12L-K2L及A45R等关键基因。这种精准的遗传修饰使得构建的新型减毒株rVTTΔC12K2ΔA45既保留了疫苗的免疫原性,又显著降低了病原性。 在动物攻毒保护实验中,该新型减毒株诱导的免疫反应对猴痘病毒表现出显著的保护效力,证明了这一技术路线的可行性和有效性。这一成果为新一代猴痘疫苗的开发奠定了坚实的科学基础。 同时,研究团队在病毒筛选技术上也实现了突破性进展。他们建立了基于实时动态监测的病毒单克隆筛选方法,将实时活细胞成像分析技术与高通量监测相结合。通过明场与荧光双通道信号的实时监控,研究人员能够精准追踪细胞病变效应的形成过程,从众多候选克隆中准确识别并分离出无污染、表型均一的纯重组克隆。这一方法显著加速了筛选进程,确保了最终疫苗株的遗传稳定性和均一性。 这些创新成果已经在DNA病毒类载体和重组病毒构建中得到实际应用,成为重组病毒载体技术平台的标志性成果。该实验室在RNA病毒类载体上也取得进展,已成功构建麻疹病毒、水泡口炎病毒等多种病毒载体。这些技术创新不仅服务于当前的传染病防控需求,更为我国未来应对新突发传染病提供了坚强的技术储备,对维护国家生物安全很重要。
从技术突破到平台成型,是提升公共卫生应急能力的关键;此次重组病毒构建与筛选技术的进展,展现了我国在疫苗核心技术的持续积累。未来,需以平台化思维推动原创技术发展——以规范化体系提高转化效率——以底线思维保障生物安全,从而在全球公共卫生挑战中占据更主动的防控优势。