市面上有一种专门用来测组织无机磷含量的试剂盒。它用的是分光光度法,能搞定50管/48样的检测。给大伙儿提个醒,在正式开始之前,最好选3个预期差异大的样本先测一测。这玩意儿为啥重要呢?因为无机磷主要指的就是磷酸根,它在生物体内干的活可多了,像能量代谢、核酸代谢,还有蛋白质的磷酸化和脱磷酸化,甚至还能促进碳水化合物的合成、转化和转运呢。 它的原理是这样的:钼蓝跟磷酸根一反应,就会生成一种在660nm处有明显吸收峰的东西。只要测一下这个波长的光吸收量,就能算出无机磷的含量。做实验的时候,你需要准备好可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL的玻璃比色皿还有蒸馏水。 试剂盒里的东西都在瓶子里装着呢。R1和R2都是液体,R3是粉剂,都得放在4℃避光处保存。临用前你得把R3先溶解在20mL蒸馏水里,再加进R2里摇匀就行。 咱们买试剂盒的时候要注意看它的基础试剂有啥。通常就是R1和R2这两个,有些还可能带个R3,主要成分都是缓冲液、酶、底物这些东西。你还得看清楚每瓶的装量是多少或者能做多少样品。 如果这盒试剂还带校准品或者质控品的话也很方便。校准品里通常放的是被测物的标准品,还配着人血清或者BSA这种基质,给出的数值都是有标准的。质控品里面有高、中、低三个浓度的被测物,能帮你验证结果准不准。 这几种东西千万别弄混了,不同批号的试剂可不能混着用。还有校准品和质控品的赋值只能对应这个批号的试剂盒。 按检测原理和目标物来分的话,生化试剂盒大概分这么几大类: 第一类是代谢物检测试剂盒,比如血糖、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)这些小分子都能测。原理大多是终点比色法或者速率比色法。血糖试剂盒就是用GOD-POD这一套反应来生成有色物质的。 第二类是酶活性检测试剂盒,SOD、CAT、POD、LDH、ALT、AST这些酶都能测。一般用的是速率法,就是看反应过程中吸光度变没变。比如SOD试剂盒就靠氮蓝四唑(NBT)来判断酶活性的高低。 第三类是蛋白定量试剂盒,像BCA、Bradford、Lowry法这些方法都有。微量BCA法适合样本量少的时候用。它是基于蛋白在碱性条件下跟Cu²⁺结合的原理来生成紫色复合物的。 第四类是离子检测试剂盒,像钙、磷、钾、钠这些无机离子都能测。比如钙试剂盒就是用偶氮砷 Ⅲ 来显色定量的。 相关产品还有很多呢......