AAV转染效率低，这事儿多半是中和抗体在捣鬼，该咋办？AAV这玩意儿可是基因治疗里的大热门，因为它组织特异性高、扩散性好、免疫原性低、安全性高、稳定性强。衣壳蛋白种类多，AAV2和AAV9是研究最多的两种，也已经进了临床。像Luxturna（Spark Therapeutics开发的，治Leber先天性黑蒙2型）用的就是AAV2，Zolgensma（诺华开发的，治脊髓性肌萎缩症）用的就是AAV9，这俩药都上市了，效果还不错。 但问题来了，大多数试验动物和人身上都有针对AAV衣壳的中和抗体。这些抗体一进到血液里，就能把AAV给拦下了。它们不让病毒进靶细胞，结果转基因的表达就少了，治疗效果自然大打折扣。有研究说过，就算是滴度很低（17:1）的NAbs，也能把大量病毒（2*10E12 vg/kg）给全消灭了。小鼠和非人类灵长类的实验也证明了这一点，1:5的NAbs就能把肝脏转导给完全挡住。 所以说体内的抗AAV中和抗体把AAV的应用给限制住了。为了让治疗更有效，在临床或临床前试验前，得先查查受试者或动物体内有没有这些抗体。利用荧光素酶报告系统在体外检测中和抗体就能知道有没有特定血清型的抗体。只要看看Luciferase的发光值RLU就行，根据数值算出样本里有没有中和抗体。 要是样本里抗体太多，说明得加大剂量才能起效。这种情况下这个血清型可能就不太适合那个动物了。 我们把待测样品按30倍、60倍、120倍、240倍、480倍、960倍这样的梯度稀释后分别和不同血清型的AAV病毒孵育，再感染293T细胞。感染24小时后用酶标仪测RLU发光值。 结果发现当血清稀释到1:60的时候，不管是AAV2还是AAV9的抑制率都能接近100%。维真生物现在能给您提供AAV1/2/5/6/7/8/9等血清型的中和抗体检测服务帮您选合适的动物模型和血清型。