agarose-glagllar-alkyne

西安凯新生物科技有限公司给大家科普一下Agarose-GLAGLLAR-Alkyne这个试剂。它实际上是预活化的琼脂糖树脂,核心设计是利用一段含有胰蛋白酶切割位点的短肽链,把末端的Alkyne(炔基)牢牢连接在琼脂糖基质上。这个树脂主要用来捕获那些被叠氮化物(Azide)修饰过的蛋白质或者它们的翻译后修饰产物。 具体操作时,先通过铜催化的点击化学反应(CuAAC),让目标分子和树脂上的Alkyne反应,形成稳定的共价键。等结合完成后,就能通过高强度的洗涤把那些非特异性吸附的杂质彻底洗掉,这样就能大大提升目标分子的纯度。最后,把捕获到的蛋白质用胰蛋白酶酶解一下,就能得到高纯度的肽段混合物,直接送去做液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)这类分析,非常适合蛋白质组学研究。 这个试剂有个特别的中文名字叫琼脂糖-GLAGLLAR-炔烃,英文名就叫Agarose-GLAGLLAR-Alkyne。它主要针对的是叠氮化物修饰的蛋白质进行富集。每毫升树脂里含有5到12 µmol的炔基,提供了充足的结合位点。它的支持介质是6%交联的琼脂糖微球,形态是球形的,粒径在50到150微米之间。一般保存成50%的匀浆状态,里面放了20%的乙醇,看起来是灰白色的,纯度能达到95%以上。 储存条件比较严格,要放在零下20摄氏度以下的地方冰冻、干燥保存,而且要避免反复冻融。操作的时候一定要戴好防护装备,别让皮肤和眼睛接触到它。如果不小心碰到了,马上用大量清水冲洗干净并去看医生。 在技术上有几个大优势:因为点击化学反应高效又有选择性,所以它能高特异性地捕获叠氮化物修饰的分子;树脂里有足够多的结合位点(每毫升5到12 µmol炔基),所以富集效率很高;还能耐受高盐和去垢剂这样的严格洗涤条件;兼容性也很广,可以按批次做纯化或者柱层析,适合不同规模的实验需求。 跟它相关的其他试剂还有:sulfo-Cyanine5.5抗体标记试剂盒、磷酸化CPG 1000固体支持物、TET磷酰胺亚基6异构体、Cyanine7二羧酸、DBCO胺三氟乙酸盐、JOE炔烃6异构体、AF 384(PEP)叠氮化物、Cyanine3B叠氮化物、VIC叠氮化物6异构体、PKH染料稀释液、Cyanine7.5四嗪、BDP 564/570 NHS酯、BDP TMR胺、Cyanine5炔烃、Cyanine5.5胺、Cyanine7.5胺、AF 488叠氮化物、Perylene叠氮化物、AF 488炔烃、Cyanine5胺。 这些内容都是由YNN编辑整理出来的,这个试剂只能用来做科研实验,不能用在人体上。