Hi大家好,今天给大家带来一份微生物群落测序数据全链路的实战指南,保证让你轻松搞定。 下面让我们进入正题。第一步,把原始数据转化为科研图,咱也不用写什么Python代码,直接拿着QIIME2的分类学注释表,用R或者一些在线工具就能搞定。 这个实战指南里面涵盖了从物种组成到环境因子关联,再到数据上传的全过程。一张图就能看懂这个全流程。下面给大家介绍一下具体的步骤。 先来说说物种组成,咱们得看看“谁在场”。利用R代码可以把门类以上的丰度堆积成彩虹条,这论文级分辨率只要30秒就能完成。 还有热图,pheatmap简洁美观,适合快速投稿。而gplots则给轴标签和聚类方法更多自由度,适合科研级细节控。 咱们再来看看Circos Table Viewer,在线神器,把OTU丰度做成360度旋转表盘,组间对比一目了然。还有三元相图展示三组样本的微生物指纹,直观反映群落差异。 接下来是样品复杂度分析。Venn图和Upset图能帮咱们看清多组样本共有的OTU池。MetaCoMET自动标注核心菌占比,避免手动筛选阈值。 桑基图把OTU丰度流向画成能量带,核心菌组和边缘菌组同时呈现出来。 现在说说Alpha多样性分析。Shannon、Simpson等指数批量计算起来特别方便。Wilcoxon秩和检验对比组间差异。 接下来是Beta多样性分析。Bray-Curtis和Jaccard距离计算可以选择不同的距离矩阵和热图颜色梯度对应群落相似度。 还有PCoA、NMDS和PLS-DA这些方法给你不同视角去查看分组结果。 现在轮到统计学验证了。STAMP在线平台版直接拖表就可以得到p值和折线图。而LEfSe用线性判别和Wilcoxon秩和组合能帮咱们找出显著差异标志物。 环境因子关联方面咱们可以用CCA/RDA进行分析,VPA分解解释比例,定量环境变量各自贡献的变异量。ABT模型还能给出交互项权重。 最后是网络与功能预测部分。相关网络用Gephi+MENAP插件就能搞定。节点大小表示丰度,边颜色表示相关性强度。 还有FAPROTAX Windows绿色版能快速把16S数据变成功能注释表,预测碳源利用、抗生素抗性等功能。 最后别忘了数据上传到NCBI上哦。宏基因组数据直接上传FastQ文件就行,扩增子数据则用BisMark/Bowtie2比对结果打包成SRA RunBioSample和BioProject同步申请号就好啦! 好了,今天的分享就到这里啦!大家快去试试吧!