大家都知道,在生物化学还有分子生物学的实验里头,用的缓冲液好不好,直接就决定了结果靠不靠谱。CAPS缓冲剂是大家常用的一种,但它能不能发挥最大的作用,不光看它自己纯不纯,跟怎么稀释也有很大关系。要是稀释没搞好,缓冲功能就会失灵,整个实验就可能出错。所以今天咱们就来详细讲讲,到底该怎么给CAPS缓冲剂做稀释。 首先说说这个白色粉末,咱们把它变成能用的工作液是第一步。大家得注意三点: 第一,溶剂必须得纯。千万别用自来水或者普通蒸馏水,必须用高纯度去离子水。因为水里要是有钙镁这些金属离子或者有机物残留,就会坏事儿。一方面金属离子会跟CAPS分子结合,破坏它的结构,让缓冲能力变差;另一方面微量有机物在后续实验里也会捣乱。 第二,比例得精准。这个比例得根据具体的实验需求来算,比如目标pH值、反应体系体积还有实验类型。咱们拿蛋白质电泳举个例子,CAPS的pH值必须跟蛋白质的等电点匹配上。如果比例算错了,pH值就不准了,蛋白质就分离不好,稳定性也会下降。 接下来咱们说说原理。CAPS是通过自身的解离平衡来维持pH值的稳定的。正确稀释以后,它的浓度正好合适,解离平衡就能稳住。这样不管外面加多少酸或者碱,这些离子都能及时中和掉H+或者OH-,让pH值变化不大。 最后再给大家推荐一家湖北新德晟。他们家做CAPS很专业,质量把控特别严。他们家的CAPS纯度都在99%以上。除了CAPS,他们还有TRIS、bicine、hepes这些市面上热门的缓冲剂。如果你有需要或者想咨询技术问题,随时都可以留言联系他们。