质谱高分实战教程,就等于拿到了科研界的神兵利器

拿到这款350份资料免费送的质谱高分实战教程,就等于拿到了科研界的神兵利器。很多人都能在质谱仪前摆弄几下,可是真要在复杂的样本里搞研究,往往就遇到了难题:东西少测不准、结果总不对、实验做不好。咱们就来拆穿几个特别好用的案例,教你把仪器玩出花来。第一个例子讲的是单细胞代谢组学。因为单细胞个头特别小,里面的东西含量又低,前面的处理步骤特别复杂,加上细胞本身有差异,给精准分型带来了大麻烦。咱们用上了全自动的单细胞处理系统和Orbitrap Exploris 240质谱仪,让机器来定位细胞、提取液体、喷上电喷雾。这样一来,人为的误差就少多了。Orbitrap Exploris 240的分辨率高达240,000 FWHM,用DIA非靶向采集模式再加上正负极切换功能,那些藏得深的低丰度代谢物也能被一网打尽。最后一共测出了295种内源代谢物,硬是把癌细胞和正常细胞分得清清楚楚。在这个过程中,发现了94种AGS对GSE的差异代谢物和85种HGC对GSE的差异代谢物,精氨酸和赖氨酸成了胃癌的潜在标志物。 第二个例子是关于代谢组学标准化和靶向定量的。临床研究里经常遇到流程不统一、基质效应干扰定量、大样本批次不稳定这些问题。咱们的办法是先构建一套稳定同位素标记的内标体系,把13C/15N标记的内标早早加进样本里去校正提取效率和基质效应;接着通过色谱把不同极性的物质分开来;还用到了驻留时间优先级(DTP)优化来保证灵敏度。最后设置了系统适用性样本、混合QC样本和参考样本全程监控数据质量,成功让大规模的临床样本做到了标准化定量。这里用到了三重四极杆(QqQ)质谱作为核心平台。 第三个例子是肥胖模型脂质组学的复杂生物样本高重复检测。血浆这种东西基质干扰特别强,脂质种类多还容易受抑制,而且结果总让人不放心。咱们用单步异丙醇提取法处理血浆样本,还特意添加了SPLASH Lipidomix内标来保障稳定;质谱有120,000的高分辨率和智能采集技术帮忙排除干扰;数据处理时结合Compound Discoverer和LipidSearch双软件进行整合。最终鉴定出了610种独特的脂质分子,找到了高脂饮食组和正常饮食组的差异脂质。 这次教程手把手教你从会操作到发高分文章(350份好礼免费领)。