在肿瘤靶向成像和叶酸受体研究中,FITC-FA是个挺经典的探针。这家叫西安凯新生物科技有限公司的供应商提供的这玩意儿,纯度起码有95%。它是种荧光标记的叶酸衍生物,把FITC的绿色荧光和叶酸的高亲和力结合在一起。具体用来做什么? 一查就知道了,主要就是研究细胞表面的叶酸受体表达,还有看它们怎么把东西吞进来。 做实验的时候怎么用呢?要是想测受体的量,可以把FITC-FA扔到细胞表面上去结合,然后用流式细胞术或者显微镜来数数。选细胞系的时候,像HeLa、KB、OVCAR-3这种受体多的挑出来就行。要是想看它是怎么进细胞里去的,直接用显微镜盯着看就行了。想搞清楚药物是怎么被细胞吞进去的?也用这一招。 在体外验证纳米粒或者药物能不能准确跑到肿瘤那儿去的时候用这个探针很方便。要是在体内,给荷瘤小鼠打一针FITC-FA,过一会儿就能在肿瘤组织里看到一堆绿色荧光(记得注意一下背景别太高)。 还可以用它来比比谁和叶酸受体亲得更紧。把FITC-FA和待测化合物混在一起孵育细胞,看谁的荧光信号更强就知道谁的亲和力高了。 不过使用的时候有些讲究。它易溶于DMSO和DMF,稍微能溶点水。通常先配成1mM的DMSO溶液存着,用的时候再拿PBS或者培养基稀释。 如果溶液里有沉淀的话,用超声震一震就能溶解了。FITC最怕光晒,操作的时候一定要避光保存。长期放冰箱的话要放在-20°C干燥处,别让它受潮变没了活性。 还有pH值的问题,要是酸性太强(pH低于5),荧光信号就会变弱。 在做实验的时候一定要设置好对照验证结果是准确的。可以用过量的游离叶酸先孵育半小时把受体占满,再看加入FITC-FA后信号有没有掉下来。另外还得准备个没有受体的细胞系(比如A549或者H1299)当阴性对照。 除了这个还有别的同类产品推荐吗?比如EsteriFluor 800 NHS Ester、EsteriFluor 810 NHS Ester、FAM phosphoramidite、6-isomer、iFluor® 488 Tyramide、iFluor 700 Styramide、FITC-Thiol(也就是FITC-SHFITC)、BSAFITC-PEG-COOH、Fluorescein PEG acid(也就是BSAFITC)、FAM-11-dCTP、6-isomer、FAM Hydrazide。 这些都是西安凯新生物科技有限公司提供的产品哦。做科研就得用这些东西,千万记住只能在实验室用啊。